二、非选择题

11．逆转录病毒载体是一种表达型质粒，结构如图所示。图上的“逆转录病毒序列”可以整合到动物细胞的染色体上，不断地表达其携带的目的基因，获得大量重组逆转录病毒。(E、F、H分别为限制酶E、F、H的酶切位点)。

(1)逆转录的模板是________，原料是________________。

(2)在构建重组质粒时，目的基因插入该质粒，此过程需要的酶是限制酶________和________。

(3)将重组质粒转入大肠杆菌前用某种离子处理大肠杆菌使之成为________，才能完成转化过程。为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加________的培养基进行培养。

(4)获取大量重组质粒后，可培育转基因小鼠，将重组质粒导入小鼠受精卵的方法是______________。若目的基因进入细胞后插入到一条染色体DNA上，那么获得转基因纯合子小鼠的方法是________________。

[答案]　(1)RNA　(四种)脱氧核苷酸　(2)F　DNA连接酶　(3)感受态细胞　抗生素A　(4)显微注射(法)　转基因小鼠间相互交配(或杂交)

[解析]　(1)逆转录是以RNA为模板，合成DNA的过程，原料是4种脱氧核苷酸。(2)构建重组质粒时，需要用同种限制酶切割质粒和目的基因，使之产生相同的黏性末端，因逆转录病毒序列在F处，所以用限制酶F进行切割，再用DNA连接酶连接，形成重组质粒。(3)将重组质粒导入到大肠杆菌，一般用Ca2＋处理大肠杆菌使之成为感受态细胞，才能完成转化过程，质粒上含有抗生素A抗性基因，如果重组质粒导入到受体细胞成功，则受体细胞在含抗生素A的培养基上培养能正常生存。所以为了筛选出含重组质粒的大肠杆菌，一般需要用添加抗生素A的培养基进行培养。(4)将重组质粒导入到小鼠受精卵中的方法是显微注射法；将目的基因插入到小鼠的一条染色体DNA上，则小鼠为杂合子，要想获得转基因纯合子小鼠可以让杂合子小鼠之间，相互交配(或杂交)。

12．(2014·焦作模拟)如图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程图解，请据图回答：

(1)图中所涉及的现代生物技术有________________等。(写3个)

(2)图中①结构表示______________；选择____________(时期)的卵母细胞去核后作为受体细胞构建重组细胞A。②所示的细胞是__________________。

(3)将健康胰岛B细胞基因导入②之前要构建______________，这是基因工程的核心，除含目的基因外，还必须含有______________等。

(4)重组细胞B在一定的细胞分化诱导剂作用下，可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的胰岛样细胞，其根本原因是________________________________________。培养重组细胞B的培养液中营养成分包括__________________(至少写两种)。

(5)图示方法与一般的异体移植相比****的优点是______________________。

[答案]　(1)细胞核移植、转基因技术、动物细胞培养、早期胚胎培养

(2)细胞核　MⅡ中期(或减数第二次分裂中期)　内细胞团细胞(或胚胎干细胞)

(3)基因表达载体　启动子、终止子、标记基因

(4)基因的选择性表达　糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆

(5)没有免疫排斥反应